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中晚期骨关节炎患者软骨细胞自噬相关因子表达变化及雷帕霉素对其软骨细胞自噬的影响

王浩  陈群超  殷丽丽  
【摘要】:目的比较中晚期骨关节炎(OA)患者软骨细胞自噬相关因子ULK1、Beclin1及LC3表达,并观察雷帕霉素对中晚期OA患者软骨细胞自噬的影响。方法收集膝关节正常软骨标本5例份(正常对照组)、中期OA软骨标本10例份(中期OA组)、晚期OA软骨标本10例份(晚期OA组),体外分离、培养软骨细胞,分别采用实时荧光定量PCR法及Western blotting法检测细胞ULK1、Beclin1、LC3 mRNA及蛋白表达。取各组软骨细胞,分别加入无血清培养基(记做0μmol/L雷帕霉素)及1、5、10μmol/L雷帕霉素,作用54 h后参照上法检测各自噬因子表达。结果与正常对照组比较,中期OA组、晚期OA组细胞ULK1、Beclin1、LC3 mRNA及蛋白相对表达量均降低,且晚期OA组降低更明显(P均0.05)。与同组加入0μmol/L雷帕霉素处理后比较,正常对照组、中期OA组经5、10μmol/L雷帕霉素处理后ULK1、Beclin1、LC3 mRNA及蛋白表达均升高,晚期OA组经10μmol/L雷帕霉素处理后ULK1、Beclin1、LC3mRNA及蛋白表达均升高(P均0.05)。与经相同浓度雷帕霉素处理后的中期OA组比较,晚期OA组ULK1、Beclin1、LC3 mRNA及蛋白表达均降低(P均0.05)。结论中晚期OA患者软骨细胞中自噬相关因子ULK1、Beclin1、LC3表达均降低,且晚期组降低更明显;雷帕霉素可诱导升高正常及中期OA软骨细胞的自噬水平,但对于晚期OA软骨细胞的自噬诱导作用不明显。

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